NEDSÄNKNINGSOLJA: SAMMANSÄTTNING, EGENSKAPER, ANVÄNDNINGSOMRÅDEN - BIOLOGI - 2025

Den immersionsolja är en viskös klar vätska med ett brytningsindex hög. Av denna anledning används den ofta i mikroskopiska observationer, eftersom det ger egenskapen att koncentrera ljus när det passerar genom mikroskopets 100X-mål och ökar dess upplösningskraft.

Detta inträffar på grund av att en viskös film bildas mellan objektivet och smetet, vilket förhindrar att ljusstrålarna sprids när de når luften, varvid ljusstrålarna koncentreras till provet.

Dropper med oljedyp och mikroskop fokuserat med 100X objektiv med oljedypning. Källa: Pixabay.com

Fördjupningsolja används endast med 100X-målet. Det är därför 100X-målet också kallas ett nedsänkningsmål. Resten är kända som torra mål. Denna lins kan inte användas utan nedsänkningens olja, eftersom utan den skulle visualiseringen inte vara tillfredsställande.

Huvudfunktionen för fördjupningsolja är att tillhandahålla tydligare, skarpare och mer definierade bilder, vilket gör att observationer av detaljer som med andra linser inte skulle vara möjliga.

Den första oljan som användes för detta ändamål var anisolja, som användes tillsammans med den första nedsänkningslinsen som skapades av Giovanni Battista Amici. Detta förhindrade bara kromatisk avvikelse, men ökade inte linssystemets numeriska öppning.

Sedan användes cederolja, men den hade många nackdelar som tvingade dess användning. Bland dem var dess höga surhet, vilket skadade målen på kort sikt.

Därefter användes andra ämnen såsom vatten och glycerin tills syntetiska nedsänkningsoljor skapades, som lite efter lite förfinades tills de nådde den nuvarande nedsänkningssoljan, som är en komplex förening av organiska ämnen.

Sammansättning av nedsänkningsolja

Nedsänkningsoljan består av en blandning av organiska föreningar såsom: terfenyl, hydrerad terfenyl, naturliga kolväten och polybutener.

Egenskaper för nedsänkningsolja

Nedsänkningsolja är en ljusgul vätska, något viskös i utseende, med en karakteristisk lukt och en densitet mellan 0,92 och 0,99 g / cm ^{^} .

Nedsänkningsolja är inte löslig i vatten och har en kokpunkt på 340 ° C. Brytningsindex a (n 20 ° C / D): sträcker sig från 1,482 - 1,516. Under tiden är blixtindexet 110 ° C och viskositeten varierar från 100 till 120 mPa.s.

Denna produkt måste kasseras ordentligt eftersom den är ekotoxisk. Med andra ord, det är skadligt för miljön, främst påverkar vattenlevande djur. Å andra sidan är det irriterande för huden och slemhinnorna. Om den intas är den nefrotisk och kardiotoxisk.

Nedsänkningsolja är stabil vid 15 till 25 ° C, temperaturen vid vilken den måste lagras.

Grundläggande om fördjupningsolja

När du använder högre förstoringslinser bör ljusets intensitet ökas. Men många av ljusstrålarna går förlorade eftersom de är spridda när de når luften (utrymmet mellan täckglaset och linsen), och till och med vissa strålar reflekteras helt.

Fördjupningsolja har ett brytningsindex som liknar glas. Därför koncentreras ljusstrålarna när oljan kommer i kontakt mellan 100X-linsen och täckglaset.

De koncentrerade strålarna passerar genom provet och skärper bilden, det vill säga öka objektets numeriska öppning och korrigera för kromatiska och sfäriska avvikelser.

Användningar eller applikationer

Användningen av fördjupningsolja är särskilt nödvändig när det är nödvändigt att observera en bild på ett bredare sätt, med det högsta förstoringsmålet (100X-målet) för att se detaljer som är viktiga för att fastställa en diagnos.

Därför används den i stor utsträckning i mikroskopiska studier inom olika områden såsom: histologi, cytologi, hematologi och bakteriologi. Till exempel är det användbart för att studera egenskaperna hos celler och vävnader hos en patient.

Det används också för analys av blodutstryk, där det är nödvändigt att specificera egenskaperna hos hemoparasiter inom och utanför erytrocyterna, liksom i Gram-beredningar, för att definiera de morphotintoriella egenskaperna hos mikroorganismerna.

Det används vanligtvis i fasta preparat, eftersom det inte rekommenderas i färska preparat. Detta beror på att oljans ytspänning gör att täckglaset rör sig, vilket får provet att växla under observation och förhindra analys.

Å andra sidan är nedsänkningsolja inte bara användbar vid konventionell ljusmikroskopi: den används också i mikroskop för total reflektionsfluorescens (TIRFM) och i applikationer med konfokal fluorescens.

Åtgärder för att observera ett preparat med fördjupningsolja

För att visa en bild under ett mikroskop, bör bilden först fokuseras med det lägsta förstoringsmålet, vanligtvis 10X, med låg ljusintensitet.

Sedan går det till 40X-målet, och ljusvägen ökas något. Vissa analyser kan utföras vid denna förstoring, men 100X förstoring krävs för att se strukturella detaljer.

Innan du flyttar till 100X-målet placeras en droppe nedsänkningsolja på täckglaset, precis där du vill observera, och sedan flyttas mikroskoptornet för att lokalisera 100x-målet i beredningen.

Ljusintensiteten regleras (ökas) (genom att flytta kondensorn och öppna membranet). Sedan bör några små rörelser av mikrometerskruven (framåt eller bakåt) fokusera perfekt om mikroskopet använder parafokala mål.

Om du försöker fokusera beredningen direkt med nedsänkningslinsen kan du ha problem med att hitta fokus. Det är inte en omöjlig åtgärd, men svårigheten ökar avsevärt.

Vård

För att använda nedsänkningsoljan måste vissa villkor beaktas.

När en färgad beredning har gjorts, till exempel en utstrykning som är färgad med Giemsa eller en Gram, vänta på att utstrykningen torkar helt innan oljedoppningen placeras. Annars bildar oljan tillsammans med vattnet miceller som inte gör det möjligt att se preparatet.

Å andra sidan, efter att ha observerat mängden preparat, det vill säga i slutet av arbetsdagen, bör 100X-målet rengöras noggrant med ett linspapper med etanol. Om linsen lämnas smutsig torkar oljan på den och då kommer det att vara mycket svårt att ta bort det, vilket skadar synfältet.

På samma sätt måste det beaktas att oljan är brandfarlig och måste hållas borta från värmekällor (tändare). Det är viktigt att undvika att värma den över 65 ° C.

Slutligen är olja en giftig produkt. Därför bör direktkontakt med hud och slemhinnor undvikas, där det kan orsaka lätt irritation. För att undvika olyckor rekommenderas användning av handskar och skyddsglasögon för att hantera det.

Vid kontakt med oljan ska området tvättas med mycket vatten. Om oljan stänker i ögonen bör den tvättas på samma sätt och håll ögonen öppna. Vid oavsiktligt intag är det viktigt att äta varmt vatten och framkalla kräkning, förutom att du går till närmaste läkare.

referenser

1. "Totalt internt reflektionsfluorescensmikroskop." Wikipedia, den fria encyklopedin. 30 dec 2018, 22:46 UTC. 14 maj 2019, 01:54
2. IVD. Mikroskopi Oljedypning. Finns på: Användare / Team / Nedladdningar.
3. Miljöbiologi och mikrobiologi. Drift av det optiska mikroskopet. Finns på: eumed.net/libros.
4. Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Mikroskopets historia och dess inverkan på mikrobiologi. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Finns i: scielo.
5. Herrero J. Practice nr 1: Grunder och användning av det vanliga sammansatta optiska mikroskopet. Universitat d´Alacant Finns på: rua.ua.es/dspace
6. Scharlau - MSDS. Fördjupningsolja, för mikroskopi. 2001. Finns på: insumos-labcentral.