NÄRINGSAGAR: GRUND, BEREDNING OCH ANVÄNDNING - BIOLOGI - 2025

Den näringsagar är en icke-selektivt medium och ingen differentiell fast kultur. Alla typer av bakterier som inte är krävande ur näringssynpunkt växer i detta medium.

Det är ett enkelt medium och trots sitt namn innehåller det ett lägre näringsvärde jämfört med andra liknande media, såsom hjärnahjärtinfusion Agar eller Trypticase Soy Agar.

Kolonier räknar med näringsämnen

Dess användbarhet i laboratoriet är mycket varierad. Det används främst för subkulturerande arter, upprätthålla stammar, räkna kolonier, som en grund för bland annat beredning av blodagar.

På grund av dess ljusbeige färg kan produktionen av pigment som alstras av vissa bakteriestammar på ett exceptionellt sätt särskiljas, såsom det grönaktiga pigmentet av Pseudomonas aeruginosa, det tegelröda pigmentet som produceras av Serratia marcescens vid rumstemperatur, det gyllene gula pigmentet av Staphylococcus aureus, bland andra.

Dessutom är det ett av de billigaste växande medierna som finns på marknaden.

Grund

Som redan nämnts ovan är det ett mycket enkelt medium som förlitar sig på att tillhandahålla näringsämnen för bakterietillväxt utan begränsningar och utan komplicerade reaktioner att tolka.

Eftersom mediet är genomskinligt är det idealiskt för att räkna kolonier med djupsåddmetoden.

Sammansättning

Det består huvudsakligen av köttekstrakt eller jästextrakt, peptoner eller gelatinpankreasdjurs, agar-agar, natriumklorid och destillerat vatten.

Kött- eller jästextraktet och peptonerna representerar de väsentliga källorna till kol och mineraler (kväve, fosfor och svavel), som kommer att användas av bakterier som en källa till energi och tillväxtfaktorer.

På liknande sätt är agar-agar basen i alla fasta odlingsmedier, som kommer att ersätta gelatin, som var den första basföreningen som användes av Robert Koch för att ge en solid konsistens till hans media.

Agar är en polysackarid som består av galaktos, galaktomannan, agaros och agaropektin. Den ställs in på 40 ° C och smälter nära 100 ° C.

För sin del ger natriumklorid mediet den osmolaritet som är nödvändig för bakterieutveckling.

Slutligen tjänar vattnet till att hydratisera och lösa de lyofiliserade föreningarna. Destillerat vatten justerat till neutralt pH bör användas. Kranvatten ska inte användas eftersom det innehåller kalcium och magnesium som kan reagera med fosfater i mediet och bilda olösliga salter.

Förberedelse

För en liter näringsagar måste 31 g av det dehydratiserade mediet vägas. Lägg den i en kolv och upplös i en liter destillerat vatten. Efter 5 minuters stående, värma över en värmekälla och blanda hela tiden tills den kokar i 1 eller 2 minuter.

Beredning av kulturmedium.

Kolven placeras sedan i en autoklav och steriliseras vid 121 ° C under 20 minuter.

Sterilisering i autoklav

I slutet av tiden tas den bort från autoklaven och serveras i sterila petriskålar med hjälp av en laminär flödeshuva eller Bunsen-brännaren.

Om petriskålarna är engångsbruk (plast) måste mediet distribueras när agaren har en temperatur på cirka 50 ° C för att förhindra att deformeras av överdriven värme.

Låt stelna och förvara på en omvänd plattahållare och kyl i 2-8 ° C tills användning.

Plattorna måste härdas innan de utsädes. Näringsämnesagarplattor bör inte användas om de är förorenade eller dehydratiserade.

PH-värdet för det beredda mediet måste justeras till 7,3 ± 0,2.

tillämpningar

Det är det enklaste odlingsmediet som används i mikrobiologilaboratoriet. Dess formulering är utmärkt för tillväxt av icke-krävande bakterier.

Dess huvudsakliga användningsområden förklaras nedan:

Som grund för beredningen av blodagar

Detta medium används ibland som en bas för att framställa blodagar, men det är inte den vanligaste basen.

Stimulera sporulering av sporbildande bakterier

Detta odlingsmedium är särskilt användbart för att stimulera sporulering av sporrbildande bakterier såsom Bacillus sp.

För detta sås en stam av Bacillus-släktet och inkuberas under 24 timmar vid 37 ° C i aerobios. När kolonierna har vuxit utsätts plattan för temperaturspänning, det vill säga temperaturen i ugnen höjs till 44 ° C och lämnas i ytterligare 24 timmar eller placeras i kylskåp under 24 timmar.

I slutet av tiden görs utstryk av kulturen och färgas med Gram-färg eller med Shaeffer-Fulton-sporfärg. Baciller med endosporer (sporer inuti bacillus) och exosporer (sporer utanför bacillus) kommer att observeras i dem.

Sila underhåll

Vissa forsknings- eller universitetsundervisningsstödlaboratorier kräver att vi håller livskraftiga bakterier av klinisk betydelse så länge som möjligt för att använda bakteriebanken (bakterioteca) för forskningsarbete eller för att förbereda undervisningsmetoder, där Studenter kommer att lära sig att manipulera och identifiera dessa mikroorganismer.

Näringsagar, såväl som hjärnainfusionsagar, kan användas för detta ändamål. Agaren bereds, hälls i rör med ett bakelitlock och lutas på en bas, på ett sådant sätt att agaren stelnar och bildar ett block i botten och en fas på ytan (räfflad näbb).

Varje rör är märkt med namnet på de bakterier som ska ympas och datumet. Var och en av bakterierna kommer att ympas på avfasningen och inkuberas i 24 h. När kolonierna har vuxit lagras rören vid rumstemperatur.

Bakterioteca måste förnyas från 1 till 3 månader för att undvika kontaminering och uttorkning av mediet och bakteriens död.

Endast icke-picky bakterier kan upprätthållas på detta sätt.

Koloniträkning

Även om det finns specialiserade medel för att räkna kolonier, såsom standardräkneargar, kan näringsagar användas för detta ändamål, antingen genom ympning med en drigalski-spatel eller genom djup. Av denna anledning är det mycket användbart i den mikrobiologiska analysen av mat och vatten.

Kör diagnostiska test

Eftersom det är ett medium som inte innehåller blod eller andra tillsatser är det idealiskt att ta kolonier som odlas på detta medium för att utföra katalasstestet.

På samma sätt, på grund av dess ljusa färg, indikeras det att genomföra oxidas-test direkt på ett område av agaren fröat utan störningar.

Återställning av mesofila aerober från saltvatten (stränder)

Näringsämnen som framställts med 10% havsvatten är användbar för utvärdering av mesofila aerober i strandvatten.

På detta sätt kan den verkliga föroreningsnivån som vattnet har med dessa mikroorganismer uppskattas, eftersom resultaten i denna typ av överlappar varandra när odlingsmedier framställda på konventionellt sätt används.

Detta demonstrerades av Cortez et al. 2013 i ett forskningsarbete.

Detta kan förklaras på grund av den plötsliga förändringen som bakterier genomgår när de går från en hypersaltad miljö till en låg-salt miljö, därför kommer mikroorganismerna i ett tillstånd av slapphet där de är livskraftiga, men inte odlingsbara.

referenser

1. "Näringsrika agar." Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 september 2016, 20:33 UTC. 29 dec 2018, 21:04 sv.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utg. Argentina. Redaktionell Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Redaktion Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier beredd med havsvatten på hälsoindikatorer i marina vatten i spa i Chichiriviche, delstaten Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M och Cardoso M. Mikrobiologisk kvalitet på vatten för inseminerande doser, för svin. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. University of Cadiz, 2: a upplagan. UCA Publications Service.