LAKTOFENOLBLÅTT: EGENSKAPER, SAMMANSÄTTNING, BEREDNING, ANVÄNDNING - KEMI - 2025

Den laktofenol blå eller blå bomull framställs med enkla färgämnesegenskaper. Det används i kliniska laboratorier för att huvudsakligen färga svampstrukturer såsom hyfer, groddrör och sporer.

Det hjälper till med den presumtiva eller preliminära diagnosen av vissa svampar, men det är alltid tillrådligt att förstärka diagnosen med mer specifika tester, till exempel biokemiska eller serologiska tester.

Grafisk framställning av laktofenolblå fläck, smuts färgad med laktofenolblått, mikroskopmonterat preparat. Källa: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Laktofenolblått består av mjölksyra, anilinblått, glycerin, fenol och avjoniserat vatten. Det kan förberedas på laboratoriet eller så kan det köpas klart att använda. När den är beredd är den redo att användas, under inga omständigheter bör den spädas, eftersom denna åtgärd ger fruktansvärda resultat.

Koncentrationen av dess komponenter gör den idealisk för färgning av svampstrukturer, eftersom fenol eliminerar den medföljande bakteriella mikrobiota, medan mjölksyra genererar en skyddande film runt svampstrukturen. Slutligen har anilinblått en affinitet att hålla fast vid svampstrukturer.

Grund

Med laktofenolblått utförs en enkel färgning av svampstrukturerna i en viss mykologisk kultur. Det kallas enkelt eftersom det bara använder ett färgämne.

Laktofenolblått, bortsett från färgning, fungerar också som en klarare av provet, tack vare den gemensamma verkan av mjölksyra och fenol, dessutom uppträder fenol som en mordant och samtidigt förhindrar lysningen av mikroorganismen genom att hämma de hydrolytiska enzymer som kan vara närvarande.

Medan mjölksyra bevarar morfologin i svampens strukturer.

Å andra sidan har anilinblått egenskapen att vidhäfta eller binda till kitininnehållande strukturer. Strukturerna är färgade ljusblå.

Det bör noteras att cellväggen hos svampmikroorganismer, speciellt mögel, innehåller kitin, varför detta färgämne är idealiskt för färgning av dessa mikroorganismer.

egenskaper

Laktofenolblå lösning är ett starkt surt, lätt grumligt vattenfärg med en ljusblå färg. Det förblir stabilt om det förvaras mellan 15 ° C och 25 ° C. Flaskan måste hållas ordentligt stängd. Det är irriterande och frätande för hud och slemhinnor.

Sammansättning

Formeln för framställning av en liter laktofenolblå är följande:

-250 g / L mjölksyra

-1,0 g / L anilinblått eller metylblått

-500 g / L glycerin

-250 g / L fenol

-250 ml avjoniserat eller destillerat vatten.

Fenolen löses i det tidigare uppvärmda vattnet. Mjölksyra och glycerin tillsättes och blandas mycket väl. Slutligen upplöses anilinblå. Den blandas igen och är klar för användning.

Delarna för att framställa 80 ml laktofenolblå lösning är:

-20 g fenolkristaller

-20 ml mjölksyra

-40 ml glycerin eller glycerol

-20 ml destillerat vatten.

Använda sig av

Det används för att färga svampstrukturer och genom de morfologiska egenskaper som observerats på mikroskopisk nivå, för att kunna göra en presumtiv diagnos av svampen.

Bearbeta

Färgning av svampstrukturer i kulturer

- Ta en ren odling av svampen vars strukturer ska observeras.

- Arbeta helst i en laminär flödeshuva eller under tändaren med en mask och handskar, eftersom det är nödvändigt att uppfylla biosäkerhetsstandarder, eftersom de flesta formar är lätta att sprida i miljön och därför utgör en fara för operatören.

- En droppe laktofenolblå placeras på en bild.

- Skär en liten fyrkant av tejp av god kvalitet och fäst den noggrant vid änden av det kalla steriliserade platinahandtaget.

- Platinahandtaget närmar sig den mest ytliga delen av svampkolonin och kulturen berörs mycket noggrant, exakt där limtejpen finns.

- Därefter tas den till objektglaset och placeras direkt på droppen laktofenolblått, och se till att tejpen är perfekt utdragen och smörjas med färgämnet. Platinahandtaget är mycket försiktigt avlägsnat.

- En annan droppe laktofenolblått placeras på tejpen och ett täckglas på toppen. Använd inte för mycket tryck för att inte förstöra svampens strukturer, eftersom de är extremt bräckliga. Färgämnet bör tillåtas agera i cirka 3 till 4 minuter.

- Efter denna tid är beredningen redo att observeras under ett mikroskop i förstoring av 10X eller 40X. Om 100X-observation krävs, bör nedsänkningsolja användas.

- Svampens strukturer, i allmänhet, är färgade blått, med undantag för de nedbrytande svamparna som bibehåller sin karakteristiska bruna färg på denna typ av svamp.

Direkt biologisk provfärgning

Om det är nödvändigt att studera ett direkt biologiskt prov, såsom sputum, pus, utsöndringar, utsöndringar, bland andra, måste dessa ha en tidigare procedur för dekontaminering av provet. NaOH-lösning används för detta.

Vid hårprover kan dessa färgas direkt.

Flera påverkade hårstrån (totalt 10) tas från de antagliga tennakapitlesionerna (alopekiska områden) och placeras på en bild (3 till 4 hårstrån per bild). Några droppar laktofenolblått placeras ovanpå och täcks omedelbart med täckglas.

Ta tag i bilden med pincett och värm försiktigt över en brännare. För att göra detta, gör 3 till 4 snabba passeringar genom lågan. Observera mikroskopet vid 40X och leta efter sporer utanför eller inuti håret (ectothrix respektive endothrix). Tillsätt vid behov nedsänkningsolja och observera vid 100X.

Kämrörsfärgning i identifiering av

Efter inkubering av den presumtiva kulturen av Candida albicans i humant serum i 2 till 4 timmar vid 37 ° C, tas en del av lösningen och färgas med laktofenolblått. Beredningen observeras under mikroskopet vid 40X. Kämtröret är närvarande och blastosporerna färgar ljusblått.

Lactophenol Säkerhetsdatablad

National Fire Protection Association (NFPA), upprättar säkerhetsdatabladet för kemiska ämnen i termer av risken som det representerar enligt olika aspekter, dessa symboliseras av en färgad romb och ett nummer som sträcker sig från 0- fyra.

Hälsorisker identifieras i blått, brännbarhet i rött, instabilitet eller reaktivitet i gult och alla speciella faror i vitt.

Hälsa

Hälsorisken som laktofenolblått medför enligt NFPA är nivå 3. Detta innebär att ämnet är extremt farligt vid intag eller i direkt kontakt med hud eller slemhinna.

Det är en mycket frätande och irriterande substans.

Vid kontakt med hud och slemhinnor orsakar det allvarliga brännskador.

Om det intas kan det orsaka huvudvärk, förvirring, slöhet, medvetslöshet, andningsstopp och till och med död.

Eldfarlighet

Enligt NFPA är Lactophenol Blue rankad som nivå 1 för brandfarlighet. Detta innebär att den bränner bara om den värms över 94 ° C.

Instabilitet

Listas enligt NFPA på nivå 0 (noll) i termer av reaktivitet. Detta innebär att den inte har någon risk för reaktivitet, det vill säga att det är ett kemiskt stabilt ämne.

Särskilda faror

Det ger inga extra speciella faror.

referenser

1. SAR-laboratorium. Lactophenol Blue. 2010. Finns på: labsar.com.
2. Tillämpat kliniskt kemilaboratorium. Laktofenolblått. 2015. Finns på: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Laktofenolblå mikroskopi i lösning. 2017. Finns på: Användare / Equipo / Nedladdningar
4. Nödkort. Laktofenolblå lösning för svampfärgning. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Finns på: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknik för färgning av svampstrukturer med vegetabiliska färgämnen som ett icke-förorenande alternativ. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Finns på: Redalyc.
6. Laboratorium Himedia. Lactophenol Cotton Blue. 2017. Tillgängligt från: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Skådespelare J, Dasgupta A. Biokemiska tester och färgningstekniker för mikrobiell identifiering. Science Direct, 2017; 61-73. Tillgängligt från: Elsevier