- Kvantifiering av antistreptolysin O-antikroppar
- Grund för ASTO-tekniken
- Tekniker
- - Halvkvantitativ teknik
- tolkning
- - Kvantitativ teknik
- tolkning
- Referensvärde
- rekommendationer
- Patologier med höga antistreptolysin O-titrar
- Post streptokock autoimmuna sjukdomar
- Reumatisk feber
- Akut glomerulonefrit
- referenser
Den O ASO är antikropp genereras som svar på en infektion orsakad av Streptococcus pyogenes, även kända som Streptococcus beta-hemolytisk A. Denna grupp producerar två exotoxiner med hemolytiska aktivitets samtal streptolysins "S" och "O" .
Streptolysin S ansvarar för beta-hemolysen som förekommer i blodagar och även om den är giftig för vissa celler i immunsystemet är den inte antigen. Medan streptolysin O, som är labilt mot syre, ansvarar för hemolysen som förekommer under blodagaren och detta är antigen.
Streptococcus pyogenes / Diagram över vad som händer i ASTO-testet (agglutineringsreaktion). (Antikroppar bundna till latexpartiklar som innehåller det specifika antigenet). Källa: Användare: Graham Beards / Alejandro Porto
Därför, när cellerna i immunsystemet interagerar med streptolysin O, produceras ett specifikt immunsvar, som genererar aktiveringen av B-lymfocyter. Dessa celler producerar antikroppar riktade mot streptolysin O. Därför kallas antikropparna antistreptolysin O.
Streptococcus pyogenes producerar olika patologier, bland vilka är: tonsillit, erysipelas, impetigo, puerperalfeber, skarlagnsfeber och septikemi. Anti-streptolysin O-antikroppar förekommer 8 till 30 dagar efter infektionsstart.
De flesta av dessa infektioner är mycket vanliga i befolkningen, så det är vanligt att människor har antistreptolysin O-antikroppar i blodet. Låga titrar indikerar en tidigare infektion med denna bakterie, men en hög eller stigande titer indikerar en nyligen pågående eller pågående infektion.
Kvantifiering av antistreptolysin O-antikroppar
På laboratoriet kan anti-streptolysin "O" antikroppstiter mätas genom ett serologiskt test. Antistreptolysin O (ASTO) -testet baseras på en agglutineringsreaktion med latex.
Det kan göras semi-kvantitativt, rapportering i kors eller titer kan också kvantifieras. Det är normalt och inte signifikant att hitta värden upp till 200 IE / ml eller Todd-enheter / ml. Över detta värde anses det vara positivt och kliniskt signifikant.
Detta test kräver inte att patienten fastar. Serum används som ett prov, det vill säga patientens blod dras och placeras i ett rör utan antikoagulant, och centrifugeras sedan för att erhålla serumet.
Grund för ASTO-tekniken
Tekniken använder latexpartiklar som stöd för fixering av streptolysin O-antigenet De absorberade antigenpartiklarna reageras med patientens serum. Om patienten har antistreptolysin O-antikropp kommer dessa att binda till antigenet som är bundet till latexpartikeln.
Denna bindning orsakar en agglutination som är makroskopiskt synlig. Reaktionens intensitet är direkt proportionell mot koncentrationen av närvarande antikroppar.
Tekniker
- Halvkvantitativ teknik
Reaktionens intensitet kan semi-kvantifieras i kors. För att göra detta tas en serologisk reaktionsplatta och placeras:
50 pl serum och 50 pl ASTO-reagens. Blanda väl med en träpetare och lägg den i en automatisk mixer i 2 minuter. Observera. Om en automatisk rotator inte är tillgänglig måste den göras manuellt.
tolkning
Suspension utan klumpar (enhetlig): negativ
1. + = svag reaktion
2. ++ = svag reaktion
3. +++ = måttlig reaktion
4. ++++ = stark reaktion
Sera som är positiva med 3 och 4 kors kan kvantifieras.
- Kvantitativ teknik
För kvantifiering av titern görs serieutspädningar 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.
Gör så här: Fyra provrör eller Kahn-rör togs och 0,5 ml fysiologisk saltlösning placeras på alla. Sedan tillsätts 0,5 ml patientserum till det första röret. Blandas väl. Det röret motsvarar utspädningen 1: 2.
Därefter överförs 0,5 ml till röret 2 och blandas väl. Detta rör motsvarar 1: 4-utspädningen och så vidare tills den önskade utspädningen har uppnåtts.
Ta 50 | il av varje utspädning och reagera med 50 | il ASTO-reagens på en agglutineringsplatta, såsom förklarats i den semikvantitativa tekniken.
tolkning
Den högsta utspädningen i vilken synlig agglutination observeras beaktas. Beräkningarna utförs enligt följande:
ASTO = Inverse av den högsta positiva utspädningen x teknikens känslighet (konstant).
Exempel: Patient med positiv reaktion upp till 1: 8
ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml eller Todd Units / ml.
Referensvärde
Normal vuxen: upp till 200 IE / ml
Normala barn: upp till 400 IE / ml
rekommendationer
Det rekommenderas att en positiv och negativ kontroll monteras med patienterna för att säkerställa att reagenset är i optimalt skick. Om den positiva kontrollen inte agglutinerar eller den negativa kontrollen agglutinaterar, kan reagenset inte användas.
Reaktionen måste tolkas efter 2 minuter, efter denna tid är den inte giltig om det finns agglutination. Dessa är falska positiver.
Hyperlipemisk sera stör reaktionen. De kan ge falska positiver.
Ett isolerat ASTO-värde är inte särskilt användbart. Det måste åtföljas av symtomen.
Dessutom är det tillrådligt att utföra minst 2 ASTO-mätningar när reumatisk feber eller post-streptokock glomerulonefritis misstänks för att visa ökningen av antistreptolysin O-nivåer och därmed bekräfta diagnosen.
Patologier med höga antistreptolysin O-titrar
Anti-streptolysinantikroppar ökas efter att ha lidit en Streptococcus pyogenes eller grupp A-hemolytisk Streptococcus-infektion.
Bland dem är: akut faryngit, skarlagnsfeber, impetigo, erysipelas, puerperal feber och septikemi.
Vissa patienter som har drabbats av nyligen eller återkommande streptokockinfektioner kan utveckla autoimmuna sjukdomar som en följd eller komplikation av post-streptokockinfektion, såsom akut glomerulonefrit och reumatisk feber.
Post streptokock autoimmuna sjukdomar
Reumatisk feber
Det är en inflammatorisk komplikation eller följd som kan uppträda 1 till 5 veckor efter att ha fått en streptokockinfektion. Antistreptolysin O-titrar ökar markant 4 till 5 veckor efter sjukdomens början.
En hög ASTO-titer styr diagnosen, men är inte relaterad till sjukdomens svårighetsgrad, och dess minskning innebär inte förbättring.
Antistreptolysin O-antikroppar korsreagerar mot kollagen och muskelfibrer, vilket påverkar vissa organ (hjärta, hud, leder och nervsystem, bland andra).
Denna komplikation eller följd inträffar vid hjärtinvolvering, feber, malaise, icke-suppurativ migrerande polyartrit, chorea, etc.
Akut glomerulonefrit
Akut glomerulonephritis är en icke-suppurativ följd orsakad av avsättning av antigen-antikroppskomplex på det glomerulära källarmembranet.
Bildningen och cirkulationen av antigen-antikroppskomplex (ag-ac) som genereras av streptokockinfektioner kan leda till exudativa förändringar och inflammation i glomeruli, med proteinuri och hematuri.
Dessa ag-ac-komplex deponeras i glomerulus och aktiverar komplementkaskaden, vilket resulterar i glomerulär endotelskada. Av detta skäl betraktas det som en autoimmun sjukdom, eftersom individens immunsystem skadar sina egna vävnader.
Antistreptolysin O-antikroppar är mycket höga och komplementnivåerna är låga.
referenser
- Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Finns på: wiener-lab.com.ar
- Wikipedia-bidragsgivare. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, den fria encyklopedin. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 januari 2019. Webben. 19 juli 2019.
- Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer vid hälsa och sjukdom: nivåer och betydelse. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Finns i: ncbi.nlm.nih
- Sen E, Ramanan A. Hur man använder antistreptolysin O-titer. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Finns i: ncbi.nlm.nih
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Redaktion Panamericana SA
- González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2: a upplagan, Venezuela: Direktoratet för media och publikationer vid University of Carabobo.