SELENITBULJONG: FOUNDATION, BEREDNING OCH ANVÄNDNING - BIOLOGI - 2024

Den selenit är en selektiv flytande odlingsmedium. Det designades av Leifson för anrikning av prover där förekomsten av enteropatogena bakterier i släktet Salmonella misstänks.

Detta medium uppfyller kraven från American Public Health Association (APHA) och accepteras därför för undersökning av närvaron av Salmonella i prover av avföring, urin, flytande eller fast mat, vatten, bland andra.

Selenit buljong. Källa: Foto taget av författaren MSc. Marielsa gil

Dess kemiska sammansättning gynnar återvinningen av dessa mikroorganismer och i sin tur hämmar andras tillväxt. Det är främst giftigt för de flesta bakterier som tillhör Enterobacteriaceae-familjen. Men det tillåter också återhämtning av Shigella-stammar och hämmar inte tillväxten av Pseudomonas och Proteus.

Den består av vattenfri natriumvätenselenit, vattenfri natriumfosfat, peptoner och laktos. Det finns också en variant till vilken cystin läggs till, därav namnet selenit-cystinbuljong.

För närvarande är användningen av selenit-cystinbuljong att föredra, eftersom en högre procentuell återhämtning av Salmonella erhålls, motsvarande det som observerats med andra selektiva medier för samma ändamål, såsom natriumtetrionionatbuljong.

Grund

Peptonerna i buljongen fungerar som näringsämnen för korrekt utveckling av mikroorganismer. Salmonella-stammar använder peptoner som en källa till kväve, vitaminer och aminosyror.

Laktos är det jäsbara kolhydratet, medan natriumselenit är den hämmande substansen som stoppar tillväxten av Gram-positiva bakterier och de flesta bakterier som finns i tarmfloraen, särskilt av Enterobacteriaceae-familjen. Natriumfosfat är bufferten som stabiliserar mediets pH.

När det gäller selenbuljongvarianten innehållande L-cystin är denna ytterligare förening ett reduktionsmedel som minimerar toxiciteten för selenit, vilket ökar återvinningen av Salmonella.

Förberedelse

-Selenitbuljong

Om du har komponenterna i blandningen kan du väga:

4 g vattenfri natriumvätenselenit.

10 g vattenfri natriumfosfat.

5 g peptoner.

4 gram laktos.

Lös upp föreningarna i 1 liter sterilt destillerat vatten. Det kan värmas något för att upplösas fullständigt.

Vissa laboratorier utsätter mediet i 10 minuter i strömmande ånga för att sterilisera det, eftersom en autoklav inte ska användas. Om mediet steriliseras kan det förvaras i kylen tills det används.

Det kan också beredas icke sterilt och serveras direkt 10 till 15 ml i sterila provrör.

I det här fallet ska det låta vila och använda omedelbart. Eftersom mediet inte är sterilt kan det inte förvaras i kylskåp för senare användning.

- Beredning av den kommersiella miljön

Om det kommersiella mediet finns tillgängligt, väger du 23 g av det dehydratiserade mediet och löser det i en liter sterilt destillerat vatten. Värm kort för att avsluta upplösningen. Autoklavera inte. Server aseptiskt 10 eller 15 ml i sterila provrör.

Mediets slutliga pH bör vara 7,0 ± 0,2.

Det bör noteras att färgen på det dehydratiserade mediet är beige och beredningen är lätt och genomskinlig bärnsten.

Selenit-cystin buljongvariant

Den innehåller samma föreningar som selenbuljong, men 10 mg cystin tillsätts. Resten av proceduren är exakt densamma som beskrivits ovan.

tillämpningar

Detta medium är speciellt att användas i epidemiologiska studier, i de fall då sjukdomen inte är i sitt akuta stadium, asymptomatiska patienter eller friska bärare.

Isolering av släktet Salmonella är i allmänhet svårt, eftersom de vanligtvis endast är dåligt förorenande prover. I små mängder överlappas det lätt av tillväxten av andra bakteriella släkter som finns i större mängd.

Å andra sidan utsätts råvaran som bearbetade livsmedel görs ofta för bland annat värme, dehydratiseringsprocesser, användning av desinfektionsmedel, strålning och konserveringsmedel.

Därför misshandlas Salmonellas som finns i råmaterialet genom att utsätta produkten för ovannämnda industriella processer. På samma sätt, vid kliniska prover som avföring, kan stammarna vara svaga om de kommer från patienter som har behandlats med antibiotika.

Därför bör varje prov i vilket närvaron av Salmonella misstänks förberikas i laktosbuljong och därefter anrikas i selenitbuljong för att optimera dess återhämtning i selektiva medier, såsom SS-agar, xylosagar, lysindeoxykolat (XLD) ), enterisk Hektoen-agar (HE) och ljusgrön agar, bland andra.

sås

För avföringsprover, ta 1 g prov och häng i ett rör med 10 till 15 ml selenbuljong. Om avföringen är flytande, ta 1 ml och häng i buljongen. För rektalvattpinnar, tappa vattpinnmaterialet i buljongen.

I fasta livsmedelsprover ta 1 gram och häng i selenbuljongen.

I flytande livsmedel blandas i lika delar med selenbuljongen i dubbel koncentration.

För urinprover, centrifugera, släng supernatanten, ta allt sedimentet och häng det i selenitbuljongen.

Buljongen inkuberas vid 37 ° C under 24 timmars inkubation. Bakterietillväxt framgår av grumlighet. Ett ytterligare rör per prov kan också inkluderas för inkubation vid 42 ° C. Därefter sådd av selektivt fast medium från selenbuljongen.

QA

För att kontrollera sterilitet inkuberas en selenitbuljong från varje oinokulerad sats vid 37 ° C under 24 timmar. Det förväntas att mediet inte har någon grumlighet eller färgförändring.

Kända stammar kan användas för att kontrollera att mediet fungerar korrekt, såsom:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 och Proteus mirabilis ATCC 43071.

De förväntade resultaten är:

• För de tre första bakteriestammarna måste tillväxten vara tillfredsställande.
• För Escherichia coli partiell hämning.
• För Proteus måttlig tillväxt.

begränsningar

Selenitbuljong är giftigt för människors hud, därför bör direkt kontakt undvikas.

referenser

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. Jämförelse mellan odlingsmedier av natriumselenit och natriumtetrionionat, båda inkuberade vid 37 ° C och 42 ° C under isolering av Salmonella spp från avföring hos bärare. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Britannia Laboratories. Selenito buljong. 2015. Finns på: britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Selenit buljong. Finns på: foodafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira-Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Mikrobiologisk isolering av Salmonella spp. och molekylära verktyg för detektering. Hälsa, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Tillgänglig från: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utg. Redaktör Panamericana SA Argentina.