- Historia
- Vad är Benedict-reagenset för?
- Detektion av glukos i urinen
- Lösningsfärgning
- Detektion av olika monosackarider och disackarider
- Komponenter
- Förfarande för användning
- Benedictts testreaktion
- Beredning av Benedictts reagens
- referenser
Den Benedict 's reagens är en blå kopparlösning som används för att detektera närvaron av reducerande sockerarter: aldehyder, alfa-hydroxiketoner och hemiketaler. Det utvecklades av Stanley R. Benedict (1884-1936).
Alpha-hydroxy-keton socker kännetecknas av att ha en hydroxylgrupp i närheten av ketonen. Under tiden är en hemiketal en förening som är resultatet av tillsatsen av en alkohol till en aldehyd eller keton. Benedictts reagens reagerar oskärligt med alla dessa reducerande sockerarter.

Färgningarna av provrören efter tillsats av Benedictts reagens gör det möjligt för oss att veta semikvantitativt hur många reducerande sockerarter som har lösts upp. Källa: Thebiologyprimer
Benedictus metod är baserad på den reducerande effekten av socker på Cu 2+ , som är blå i färgen, vilket omvandlar den till Cu + . Cu + bildar en tegelröd fällning av kopparoxid. Beroende på koncentrationen av sockerarter visas emellertid ett spektrum av färger (övre bilden).
Observera att om Benedictts reagens läggs till ett provrör utan att socker reduceras (0%), upplever det ingen förändring i dess blåaktiga färg. När koncentrationen är högre än 4% är teströret således färgat brunt.
Historia
Reagenset skapades av den amerikanska kemisten Stanley Rossiter Benedict 1909, som publicerade sin vetenskapliga artikel A-reagens för detektion av reducerande sockerarter i tidskriften J. Biol. Chem.
Vidare publicerade Lewis och Benedict (1915) en metod för bestämning av att minska socker i blod, med användning av pikrat som indikator; men det avbröts på grund av dess brist på specificitet.
Benedictts reagens liknar Fehlings. De skiljer sig åt att Benedict använder citratjonet och natriumkarbonatsaltet; medan Fehling använder tartratjon och natriumhydroxid.
Benedict-testet är kvalitativt, det vill säga det upptäcker endast närvaron av reducerande sockerarter. Benedictts reagens kan emellertid vara kvantitativt om det har kaliumtiocyanat i lösning, som bildar en vit fällning av koppartiocyanat som kan titreras med användning av glukosstandarder.
Vad är Benedict-reagenset för?
Detektion av glukos i urinen
Benedictts reagens används fortfarande för att upptäcka närvaron av glukos i urinen och är en indikation på diabetes sjukdom hos patienten, vars urin underkastas Benedict-testet. Det kan dock inte uteslutas att glukosuri har ett annat ursprung.
Till exempel finns ökad glykosuri i tillstånd såsom: graviditet, primär njurglykosuri, renal tubulär acidos, primärt eller sekundärt Fanconi-syndrom, hyperaldosteronism och akut pankreatit eller bukspottkörtelcancer.
Benedictts reagens har blå färg på grund av närvaron av Cu 2+ , vilket reduceras till Cu + genom att reducera sockerarter; i detta fall fälls glukos ut och bildar en tegelröd koppar (I) oxid.
Lösningsfärgning
Färgningen och bildningen av fällningen i Benedict-testet applicerat på urin varierar beroende på koncentrationen av det reducerande sockret. Om glukoskoncentrationen i urinen är mindre än 500 mg / dL blir lösningen grön och det bildas ingen fällning.
Glukoskoncentration i urin på 500-1000 mg / dL orsakar en grön fällning i Benedict-testet. Vid en koncentration större än 1 000 till 1 500 mg / dL orsakar det bildandet av en gul fällning.
Om glukoskoncentrationen är 1 500 - 2 000 mg / dL kommer en orange fällning att ses. Slutligen är en koncentration av glukos i urinen större än 2 000 mg / dL, det kommer att orsaka bildandet av en tegelröd fällning.
Detta indikerar att Benedict-testet har en semi-kvantitativ karaktär och resultatet rapporteras med kors. Således motsvarar till exempel bildningen av en grön fällning ett kors (+); och bildningen av en tegelröd fällning, motsvarar fyra kors (++++).
Detektion av olika monosackarider och disackarider
Benedictts reagens upptäcker närvaron av reducerande sockerarter som har en fri funktionell grupp eller en fri ketonfunktionell grupp, som en del av deras molekylstruktur. Detta är fallet för glukos, galaktos, mannos och fruktos (monosackarider) samt laktos och maltos (disackarider).
Sackaros och stärkelse reagerar inte med Benedictts reagens eftersom de har fria reducerande grupper. Dessutom finns det föreningar som interfererar med Benedict-testet i urin, vilket ger falsk positivitet; sådant är fallet med salicylat, penicillin, streptomycin, levodopa, nalidixinsyra och isoniazid.
Det finns kemikalier i urinen som kan minska Benedikt-reaktionen. till exempel: kreatinin, urat och askorbinsyra.
Komponenter
Komponenterna i Benedictts reagens är följande: kopparsulfatpentahydrat, natriumkarbonat, trinatriumcitrat och destillerat vatten.
Kopparsulfatpentahydrat, CuSO 4 · 5H 2 O, innehåller Cu 2+ : det är den förening som ger Benedict reagens sin blå färg. De reducerande sockerarterna verka på Cu 2+ , orsakar dess reduktion till Cu + och bildandet av en tegelröd fällning av kuprooxid (Cu 2 O).
Natriumkarbonat genererar ett alkaliskt medium, vilket är nödvändigt för att kopplingen ska kunna reduceras. Natriumkarbonat reagerar med vatten, alstrar natriumbikarbonat och hydroxyljonen, OH - , ansvarig för alkaliniteten hos mediet som är nödvändigt för att reduktionsprocessen ska ske.
Natriumcitrat bildar ett komplex med koppar (II) som förhindrar att det undergår lagring till Cu (I).
Förfarande för användning
5 ml av Benedictts reagens placeras i ett 20 x 160 mm provrör och 8 droppar urin tillsättes. Provröret skakas försiktigt och placeras i en behållare med kokande vatten i 5-10 minuter.
Efter denna tid avlägsnas röret från varmvattenbadet och ytan kyls med rinnande vatten för att slutligen få avläsning av resultatet som erhålls vid utförandet av Benedict-testet (färgerna).
Benedictts testreaktion
Reduktionen av Cu (II) under Benedict-testet kan schematiseras enligt följande:
RCHO + 2 Cu 2+ (i komplex) + 5 OH - => RCOO - + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehyd; RCOO - = (karboxylatjon); Cu 2 O = kuprooxid, en tegelröd fällning.
Beredning av Benedictts reagens
173 gram natriumcitrat och 100 gram natriumkarbonat vägs ut och upplöses tillsammans i 800 ml varmt destillerat vatten. Om spår av olösta ämnen observeras måste lösningen filtreras.
Å andra sidan upplöses 17,3 gram kuprisulfatpentahydrat i 100 ml destillerat vatten.
Därefter blandas de två vattenhaltiga lösningarna försiktigt och kontinuerlig omröring fortsätter, vilket gör upp till 1 000 ml med destillerat vatten.
referenser
- Graham Solomons TW, Craig B. Fryhle. (2011). Organisk kemi. Aminer. (10: e upplagan.) Wiley Plus.
- Clark J. (2015). Oxidation av aldehyder och ketoner. Återställd från: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). Benedictts reagens. Återställd från: en.wikipedia.org
- Redaktion. (9 januari 2019). Benedictts test: princip, reagensberedning, procedur och tolkning. Återställd från: laboratoriuminfo.com
- Dr. Whitson. (Sf). Benedictts reagens: Ett test för att minska sockerarter. Återställd från: nku.edu
