- Färgämnen som används i enkel färgning
- De 6 stegen till enkel färgning
- Steg 1
- Observation
- Steg 2
- Observation
- Steg 3
- Steg 4
- Observation
- Steg 5
- referenser
Den enda färgning är en färgningsproceduren snabbt och enkelt i vilken en enda färgämne används, så det kallas enkelt. Det används främst för att bestämma morfologin och organisationen av cellerna som finns i ett prov.
Cellerna är naturligtvis färglösa, så det är nödvändigt att göra dem synliga på något sätt när de ses under mikroskopet.
Mänskliga kindceller färgade med enkel metylenblå färgning.
Det är viktigt att lyfta fram att färgämnena som används vid enkel färgning måste vara grundläggande med en positiv laddning (katjonisk), så att de spontant kan binda till cellväggen och cytoplasma.
Dessa cellstrukturer är negativt laddade. Av detta skäl lockas det positivt laddade färgämnet till cellerna och binds till dem spontant. Således färgas alla celler som finns i ett prov snabbt.
Färgämnen som används i enkel färgning
Det finns flera grundläggande fläckar som kan användas i mikrobiologilaboratoriet. De mest använda är:
- Metylenblå.
- Kristallviolett.
- Malakitgrönt.
- Grundläggande fuchsin.
Alla dessa färgämnen fungerar bra i bakterier eftersom de har positivt laddade (katjoniska) färgjoner (kromoforer).
Färgningstiderna för de flesta av dessa fläckar är relativt korta. De sträcker sig vanligtvis från 30 sekunder till 2 minuter, beroende på färgämnets affinitet.
Det är viktigt att komma ihåg att det måste förlängas och fästas vid glasglaset (glid) innan färgning av ett prov med enkel färgning. det förlängda och fasta provet kallas en smet.
De 6 stegen till enkel färgning
Steg 1
Placera bilden på ett färgningsställ och applicera önskad fläck. Låt motsvarande tid agera.
Vanligtvis tar enkel färgning några sekunder till ett par minuter, beroende på vilken fläck som används.
Observation
I detta steg är det viktigt att inte överskrida den rekommenderade tiden för det färgämne som används, eftersom kristaller kan bildas på arket och producera så kallade "artefakter" som snedvrider cellernas morfologi.
Steg 2
Tvätta försiktigt smet från sliden med destillerat vatten från en flaska, eller också med långsamt rinnande kranvatten tills avrinningen blir klar. Detta tar vanligtvis 5-10 sekunder.
Observation
Applicera inte vattenströmmen direkt på smet, för att undvika att kraften av samma skada provet.
Om du inte har destillerat vatten kan du använda kranvatten utan problem eftersom det inte påverkar resultatet av färgningen.
Steg 3
Släpp bilden med absorberande pappershanddukar i en riktning och utan att gnugga. Se till att glidens undersida är ren.
Steg 4
Observera det färgade utstryket under mikroskopet. Börja med de mest avlägsna målen för att hitta det område du vill observera mer korrekt. Ändra målet för att komma närmare och närmare provet.
Observation
För att använda objektivet med högre förstoring (normalt 100X) bör nedsänningsolja användas, eftersom det hjälper ljuset att tränga bättre och bilden blir skarpare. Det är inte nödvändigt att använda ett täckglas.
Steg 5
Avsluta slutligen alla prover i en lämplig behållare som är korrekt märkt "biohazard".
referenser
- (2001). Mikrobiologiska tillämpningar: Laboratoriehandbok i allmän mikrobiologi (8: e upplagan). McGraw-Hill-företagen.
- Harisha, S. (2006). En introduktion till praktisk bioteknik (1 st ). Brandvägg Media.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Preliminär färgning av bakterier: Enkla fläckar. Aktuella protokoll i mikrobiologi, (SUPPL. 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Alcamos Fundamentals of Microbiology Laboratory (10: e ). Jones & Bartlett Learning.
- Prescott, H. (2002). Laboratorieövningar i mikrobiologi (5: e ). McGraw-Hill-företagen.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principer för mikrobiologi (1 st ). Tata McGraw-Hill utbildning.