- Grund
- Förberedelse
- Använda sig av
- Typ av prover
- provtagning
- Identifiering av provet
- Överföra
- Forskning genomförd på transportmedlet Cary Blair
- QA
- referenser
Den genomsnittliga Cary Blair är en halvfast agar som används för transport och bevarande av biologiska prover med tarmpatogener, mikroorganismer och anaerob labil. Liksom alla transportmedel är dess funktion att hålla provet i optimala förhållanden tills det odlas. De patogena mikroorganismerna som finns, liksom den medföljande mikrobiota, måste förbli livskraftiga, men utan att öka deras population.
Cary Blair Medium är resultatet av formuleringsändringen för Stuart Transport Medium. Modifieringen genomfördes 1964 och bestod av att ersätta pH-regleringssystemet (glycerofosfat) med en fosfaterad oorganisk buffert.
A. Culturette med Cary Blair Medium B. Avföringssamlare med Cary Blair Medium. Källa: A. Video Meganhow, få en sårkultur 2011 youtube.com B. Användare: Mattes
Omformuleringen var nödvändig eftersom dess skapare insåg att glycerofosfat efter en viss tid kunde metaboliseras av vissa saprofytiska bakterier. Dessa multiplicerar överlappar de närvarande patogenerna.
Andra förändringar var eliminering av metylenblått såväl som en justering av pH-värdet mot alkalinitet (pH 8,4). Alla dessa förändringar förbättrade transportmedlets effektivitet.
Ursprungligen användes Cary Blair-medium för upprätthållande av tarmpatogener, såsom Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae och Campylobacter sp.
Effekten av att bevara livskraften hos krävande och labila patogener, såsom: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae och några anaerober, har emellertid sett.
Grund
Cary Blair Medium innehåller natriumklorid, natriumtioglykolat, dinatriumfosfat, kalciumklorid och agar.
Natriumklorid upprätthåller den osmotiska balansen i mediet, dinatriumfosfat och kalciumklorid balanserar pH. För sin del bibehåller natriumtioglykolat en låg oxidationsreduceringspotential, medan den lilla delen av agar ger halvfast konsistens.
Cary Blair-mediet innehåller inte näringsämnen, eftersom transportmediets funktion är att hålla provet utan att det genomgår förändringar vad gäller fukt och mikrobiell belastning. det vill säga undviker dehydratiseringen av provet samtidigt som vi håller livskraften och mängden närvarande mikroorganismer.
Slutligen förhindrar det något alkaliska pH-värdet döden av mikroorganismer genom surhet, särskilt Vibrios är mycket känsliga för syror.
Förberedelse
Cary Blair-medium är kommersiellt tillgängligt som en speciell redo att använda. Transportsystemet täcks av en plastpåse. Inuti den innehåller en vattpinne för att samla provet och behållarröret för Cary Blairs halvfasta medium.
Även på marknaden finns det kommersiella hus som levererar det dehydratiserade mediet för dess beredning i laboratoriet.
För att göra detta väger du 13,2 g av det dehydratiserade mediet och löser det i en liter destillerat vatten. Värm upp och skak beredningen tills den är helt upplöst. Distribuera mediet i skruvklädda provrör (Bakelite).
Ånga rören i 15 minuter. Låt svalna och hålla i rumstemperatur tills användning.
Oinokulerat Cary Blair-medium kan lagras optimalt i upp till 18 månader vid rumstemperatur.
Mediets pH måste justeras till 8,4 ± 0,2. Färgen på det beredda mediet är beige, med en viss opalescens.
Använda sig av
Typ av prover
Cary Blair Medium används när avföringsprover, rektala vattpinnar och vaginala vattpinnar inte kan behandlas omedelbart.
När inga transportmedel finns tillgängliga kan prover lagras vid -70 ° C.
provtagning
Vattpinnen impregneras med provet och införs i Cary Blair-mediet utan att nå botten.
Identifiering av provet
Cary Blair-mediet måste ha en etikett på vilken basdata är placerade, såsom: för- och efternamn på patienten, provets identifikationsnummer, provkällans källa, behandlande läkare, datum och tid för insamlingen. prov, presumtiv diagnos, antibiotikabehandling.
Överföra
Tätt täckt och transporterat vid rumstemperatur för fekala prover. För vaginalprover på jakt efter anaeroba mikroorganismer rekommenderas det att transportera proverna vid 4 ° C.
I alla fall är den rekommenderade överföringstiden 4-6 timmar, med högst 24 timmar.
Om förekomsten av Campylobacter jejuni misstänks i avföringsprover och dessa inte kan behandlas inom 24 timmar, rekommenderas lagring i Cary Blair-medium vid 4 ° C.
Forskning genomförd på transportmedlet Cary Blair
Flera studier har visat att Cary Blair-medium kan förbli livskraftigt för enteropatogena mikroorganismer av släktet Shigella och Salmonella i upp till 49 dagar efter att provet tagits.
Vibrio cholerae, en annan viktig tarmpatogen, kan överleva i 22 dagar, medan Yersinia pestis (orsakande medel för bubonic och pneumonic pest) kan återvinnas efter 75 dagar.
Trots den påvisade hållbarheten när det gäller återhämtningen av dessa mikroorganismer rekommenderas det dock att de prover som tas tas i Cary Blair-medium till laboratoriet så snabbt som möjligt.
På samma sätt, när provet når laboratoriet, måste det fröas utan dröjsmål i respektive odlingsmedium.
Å andra sidan rekommenderas Cary Blair-medium, förutom att det är användbart för transport av fakultativa mikroorganismer, för prover som innehåller anaeroba patogener.
I detta avseende genomförde DeMarco et al. 2017 en studie med titeln: Överlevnad av vaginala mikroorganismer i tre kommersiellt tillgängliga transportsystem.
De demonstrerade att Cary Blair Transport Medium är det bästa transportmediet för bevarande och återhämtning av vaginala anaeroba mikroorganismer. På samma sätt visade de att den högsta återvinningsgraden uppnåddes när överföringstemperaturen var 4 ° C.
Därför dras slutsatsen att transporttemperaturen för vaginala vattpinnar (anaeroba mikroorganismer) bör vara vid 4 ° C. Medan avföringsprover på jakt efter fakultativa mikroorganismer är den ideala temperaturen rumstemperaturen.
QA
För att utvärdera kvalitetskontrollen av Cary Blair transportmedium kända stammar såsom Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae och Campylobacter sp.
Mediet ympas med den valda stammen och hålls vid rumstemperatur under 24 timmar. De sås sedan i motsvarande kulturmedium. I samtliga fall förväntas en tillfredsställande återhämtning av mikroorganismen i fråga.
referenser
- DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Överlevnad av vaginala mikroorganismer i tre kommersiellt tillgängliga transportsystem. Anaerob. 2017; 45: 44–49.
- Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Jämförelse av konserveringsmedier för lagring av avföringsprover. J Clin Microbiol. nittonhundranittiofem; 33 (8): 2176–2178.
- Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Jämförelse av konserveringsmedier och frysningsförhållanden för lagring av avföringsprover. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan Redaktör Panamericana SA Argentina.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utg. Redaktör Panamericana SA Argentina.
- Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. Finns på: condalab.com
- Metrix Laboratory. Cary Blair. Finns på: metrixlab.mx