STUART MEDIUM: FOUNDATION, BEREDNING OCH ANVÄNDNING - BIOLOGI - 2025

Den mediet Stuart är en halvfast agar eller buljong utan näringsämnen, som används för transport av biologiska prover. Dess syfte är att hålla de stammar som finns i provet livskraftiga under en viss tid, men utan att öka den mikrobiella populationen.

Det skapades av Moffet, Young och Stuart 1948 och modifierades senare av Toshach och Patsula. Det består av natriumglycerofosfat, natriumtioglykolat, kalciumklorid och agar-agar. Den senare finns i det halvfasta mediet och saknas i vätskan. Vissa laboratorier lägger till metylenblått till det.

Culturette med Stuart transport. Källa: Av: CDC / Dr. Gilda Jones, med tillstånd: Public Health Image Library

De används vanligtvis när det inte är möjligt att såga provet omedelbart. I detta fall placeras provet i transportmediet medan det överförs till laboratoriet som kommer att bearbeta kulturen.

På detta sätt garanteras det att de närvarande mikroorganismerna förblir levande tills de ympas i motsvarande odlingsmedium.

Ursprungligen var dess användning avsedd att transportera urinrörs- eller vaginalprover där förekomsten av Neisseria gonorrhoeae misstänktes. Senare insåg de att användbarheten kunde vara bredare.

Stuart-mediet visade sig vara mycket effektivt när det gäller att bevara lila och hårda mikroorganismer såsom Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, bland andra. Förutom andra icke-irriterande mikroorganismer som Enterobacteria.

Stuart-mediet förhindrar i princip uttorkningen av provet, upprätthåller den osmotiska balansen och bevarar mikroorganismerna vid ett idealiskt pH. Å andra sidan innehåller strategiskt detta medium inte näringsämnen, vilket förhindrar mikroorganismer från att multiplicera.

På marknaden finns det speciella provtransportanordningar som innehåller detta eller andra transportmedel, kallad culturette. De kan också förberedas på laboratoriet.

Grund

Syftet med Stuart-transportsättet är att hålla proverna så nära deras ursprungliga skick tills de behandlas.

Natriumglycerofosfat och kalciumklorid är ett buffertsystem som fungerar genom att bibehålla pH och osmolaritet.

Under tiden fungerar natriumtioglykolat som ett reducerande medel och i fallet med att innehålla agar ger det det en halvfast konsistens, för att fördröja syresättningen av mediet. Slutligen är metylenblått en oxidationsindikator, det vill säga detekterar närvaron av syre.

Det halvfasta mediet med redoxindikator är idealisk för transport av prover där man misstänker närvaro av anaeroba bakterier.

Egenskaper för transportmedel

Stuart-mediet uppfyller, liksom alla transportmedel, vissa egenskaper, inklusive:

-Håller livskraftiga mikrobiella stammar närvarande utan att multiplicera.

-Innehåller inte näringsämnen; Dess föreningar syftar till att hålla provet hydratiserat, under adekvata pH- och osmolaritetsbetingelser.

-Hindrar autolyzatet av vissa känsliga mikroorganismer, till exempel Pneumococcus.

-Användningen är tillfällig, den bör inte förlängas för länge.

Förberedelse

Halvfast Stuart-medium med redoxindikator

Hemförberedelse

Ingredienser

Natriumglycerofosfat 10 gr

Natriumtioglykollat ​​1,0 gr

Kalciumklorid 0,1 gr

Metylenblått 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destillerat vatten 1 liter

Blanda komponenterna och värm tills de är helt upplösta. Häll i rör eller specialpinnar. De införs i autoklaven och steriliseras vid 121 ° C under 15 minuter. Låt rören svalna vertikalt (i form av ett block). Förvara vid rumstemperatur.

Beredning med kommersiellt medium

Väg 14,1 g av mediet i 1 liter destillerat vatten. Värmning skakas ofta tills den är helt upplöst, den kan kokas. Resten av proceduren som redan beskrivits.

Det dehydratiserade mediet är krämfärgat och beredd bör vara blått på ytan. Detta beror på närvaron av metylenblått.

Mediets pH måste justeras till 7,4 ± 0,2

Liquid Modified Stuart Medium (hemlagad)

Ingredienser

Natriumglycerofosfat 10 gr

Natriumtioglykollat ​​1 gr

Kalciumkloriddihydrat 0,1 gr

Destillerat vatten 1000 ml

Det har samma ingredienser som halvfast, men det har inte agar eller metylenblått. I detta fall blandas komponenterna utan uppvärmning och 0,5 ml fördelas i 16 x 125 mm rör med skruvlock.

Det steriliseras i en autoklav vid 121 ° C under 10 minuter. För provtagning bör dacronpinnar användas om provet är avsett för PCR eller rayon om det är för odling.

Rören förvaras vid rumstemperatur.

tillämpningar

Kommersiellt finns det speciella provtransportanordningar som kallas culturette; Denna enhet är ett långsträckt, tunt rör som har en vattpinne inuti och i slutet finns det ett segment som innehåller det halvfasta eller flytande Stuart-mediet.

Enheten öppnas och provet tas med vattpinnen. Den införes sedan tillbaka i röret tills spetsen av vattpinnen förs in i det halvfasta transportmediet; Vissa har med sig en polyuretansvamp impregnerad med det flytande Stuart-mediet, med vilket provet bevaras när det hålls vått.

Om man misstänker närvaron av känsliga mikroorganismer, bör bomullstussar med kol användas för att samla provet.

Proverna som kan tas med vattpinnar eller vattpinnar och överföras i detta medium är svalg exudater, rektal vattpinnar och olika utsöndringar, bland dem: vaginal, uretral, sår, okulär, otic och abscess.

Under överföring av provet i transportmediet till laboratoriet måste undvikande av mediet för extrema miljöförhållanden (för kallt eller för varmt) undvikas. Plötsliga förändringar i atmosfärstrycket bör också undvikas.

Den tid då mediet kan hålla en mikroorganism livskraftig beror på den aktuella stammen. Till exempel för mikroorganismer av släktet Neisserias och Haemophilus kan de förbli livskraftiga i upp till 24 timmar, men stammar som Salmonella eller Shigella kan pågå dagar och till och med veckor.

Om det uppskattas att bearbetningen av provet kan ta mer än fyra dagar föredras det att frysa provet vid -70 ° C.

Identifiering av provet i transportmedel

Det beredda transportmedlet eller den kommersiella kulturen måste ha en etikett där följande information kommer att placeras:

Patientens för- och efternamn: undviker provförvirring.

Identifieringsnummer: det är bekvämt att hålla en beställning på jobbet.

Provsamlingskälla: hjälper bakteriologen att välja lämpligt odlingsmedium.

Besökande läkare: Ibland är det nödvändigt för möjliga konsultationer.

Datum och tid för provtagning: det är nödvändigt för att acceptera eller avslå provet enligt den tid som förflutit mellan samlingen av provet och mottagningen i laboratoriet.

Annan information som skulle vara mycket användbar att bifoga är:

Den presumtiva diagnosen: styr tillägg av specialkulturmedier enligt den misstänkta diagnosen.

Antibiotikabehandling: det är bra att bifogas antibiogrammet.

All denna information är avgörande för att säkerställa korrekt provbehandling.

QA

För att utvärdera prestanda hos Stuart-mediet kan kända stammar inokuleras och hållas vid 25 ° C, såsom: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus 6301.

I alla fall förväntas den återhämta mikroorganismen i fråga, bevarad under 24 timmar.

Å andra sidan kan andra stammar användas såsom: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 och EschCerichia coli.

I alla fall förväntas riklig återhämtning i upp till 96 timmar.

begränsningar

Vissa studier säkerställer att glycerofosfat som finns i Stuart-mediet kan metaboliseras av vissa koliformer, bland andra Gram-negativa bakterier, och därför multipliceras i detta medium.

Denna risk ökar ju längre provbehandlingen försenas. Likaså påverkar exponeringen av Stuart-mediet för höga temperaturer under transport detta.

referenser

1. "Transportmedel (mikrobiologi)." Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 apr 2018, 10:36 UTC. 1 april 2019. Finns på: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart Transport. Finns på: Tillgängligt på: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuarts transportmedel. Finns på: lablinsan.cl
4. Vetenskaplig MDM. Fördelarna med att ha Stuart mikrobiologiskt transportmedium. Finns på: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Finns på: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utg. Redaktör Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan Redaktör Panamericana SA Argentina.