BLODSMETNING: EGENSKAPER, TYPER, TEKNIKER OCH HISTOLOGI - BIOLOGI - 2025

Den blodutstryk är en perifert blodutstryk som används för att analysera de komponenter som finns närvarande i blodcirkulationen. Observationen av en blodsmetning ger hematologiska data som är mycket användbara för diagnos och uppföljning av många patologier.

Blodsmetet gör det möjligt att kvantifiera antalet olika typer av vita blodkroppar (leukocytformel), samt analysera morfologin och formen på erytrocyter, leukocyter och blodplättar.

Beredning av blodets smet. Källa: Blod i ett laboratorieglas. Public DomainPictures.net

I den kan avvikelser i antalet celler upptäckas, såsom: leukocytos eller leukopenier, lymfocytos eller lymfopeni, neutrofili eller neutropeni, trombocytos eller trombocytopenier och eosinofili. Cellstorlek och formavvikelser kan också ses.

Dessutom är det möjligt att upptäcka olika typer av anemier, leukemier och bakterie- eller blodparasitinfektioner.

För detta finns det olika typer av utstryk som utförs beroende på syftet med studien. Det finns tunna utstryk och tjocka utstryk. Dessa utstryk skiljer sig i utförande tekniken och studiens syfte.

De med fina droppar används som komplement till fullständig hematologi. Detta ger data om leukocytformeln, förutom analysen av formen och morfologin för de tre cellserier som utgör blodet: röda serier, vita serier och blodplättar. Även om de också fungerar som ett komplement till studien av tjockblodsfilm.

Den tjocka filmen används för diagnos av sjukdomar orsakade av hemoparasiter, såsom malaria eller malaria, toxoplasmos, leishmaniasis, Chagas sjukdom, babesios och mikrofilariasis.

Egenskaper av en blodsmetning

En bra blodsmetning måste uppfylla vissa egenskaper. Bland dem kan vi nämna:

-Provet måste uppfylla minimikvalitetskraven för att vara representativ.

-Provtagningen måste utföras väl.

-Timely exekvering av smet.

-Om det utförs med venöst blod, använd ett antikoagulant som inte deformerar cellerna och bland röret innan du smetar ut.

- Om det görs med kapillärblod, släng den första droppen.

-Spridningen måste vara homogen. Detta säkerställer att cellerna är jämnt fördelade och att blodcellerna kan analyseras väl med avseende på form och antal.

-Sidorna på utstrykningen bör vara släta från början till slut.

-Sprutet måste respektera en marginal på 1 till 2 mm mot sidorna på objektglaset.

-Spridningsskiktet bör gradvis minska i tjocklek från början till slut (smet av fina droppar med glidmetoden).

-Det måste vara korrekt märkt för att undvika förvirring av prov.

-Fixa och fläcka ordentligt för tydlig observation av blodelement.

-Låt smöret torka mycket innan montering av preparatet under mikroskopet. Om du placerar nedsänkningsolja på en våt smet kommer det att orsaka bildning av miceller som förhindrar att cellerna syns.

Typer av blodsmetning

Perifera blodutstryk kan klassificeras i tunn smuts och tjockt utstryk. De med ett tunt skikt används för att studera leukocytformeln och morfologisk observation av blodceller. Extracellulära bakterier såsom borrelia och intracellulära hemoparasiter, såsom plasmodium, kan också ses.

I den fina klumpen kan parasiten art identifieras, därför är det en mer specifik teknik än den tjocka klumpen, men den tjocka klossen är mer känslig, eftersom det är en koncentrationsteknik som används för uttömmande sökning efter extracellulära hemoparasiter.

Det finns två typer av fina droppar: de som utförs på objektglas och de som utförs på täckglas. De tjocka smetarna utförs på objektglas.

Tekniker för att ta blodprover

Blodsprut kan göras från en kapillär punktering eller ett venöst prov som tas med antikoagulant. Om det utförs från blod med antikoagulant kan smältet beredas upp till 2 timmar efter att provet tagits.

Försiktighet bör vidtas vid användning av antikoagulantia som inte deformerar blodceller. Det bästa alternativet är EDTA. Tvärtom bör användning av antikoagulantia såsom trinatriumcitrat undvikas.

Om provet tas med kapillär punktering, bör smetan förlängas omedelbart innan blodet koagulerar.

Den första droppen ska kasseras, så att nästa droppe kan komma ut spontant för att undvika utspädning av provet med vävnadsvätska. Det är den mest rekommenderade tekniken för observation av cellmorfologi, eftersom blodet inte har några tillsatser.

För observation av hemoparasiter, drog Solari m.fl. i sitt forskningsarbete att båda teknikerna (venipunktur och kapillär) är lika effektiva.

Typer av blodprovtagning: A. Kapillär punktering. B. Venös punktering. Källa: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Tekniker för att förbereda blodsmetningen

Blodsmetet kan utföras manuellt på mikroskopglas eller på ett täckglas eller ett objektglas. Det är också möjligt genom automatiserad utrustning.

-Slides utstryk

Det är den teknik som de flesta laboratorier föredrar på grund av dess enkla hantering.

Använd en Pasteur-pipett för att placera en inte så tjock eller mycket fin bloddråp i mitten av ena änden av en ren bild.

Utstrykningen görs med hjälp av en annan bild med en markände. Det slipade glasskivan placeras vinkelrätt mot den motsatta änden av där droppen är belägen.

Den lutar i en vinkel mellan 30 - 45 ° och glider mot droppen; Vid beröring expanderar den linjärt över marken på marken och med en konstant och definierad rörelse återgår arket; innan du når slutet lyftes bilden.

På detta sätt sprids ett homogent lager över ytan på den mottagande sliden.

Smetet får torka. Den fixeras sedan och färgas med den föredragna fläcken. Låt torka väl innan du tittar under mikroskopet. En droppe olja placeras på ansiktet som visar utstrykningen och observeras under ett ljusmikroskop.

Blodsmetning på bilden. Övre bild: ostänkta utstryk. Nedre bild: färgad utstryk. Källa: Coinmac

Delar av utsmetningen gjord på objektglas

I denna typ av utstryk kan man definiera tre definierade områden: huvudet, kroppen och svansen. Huvudet motsvarar området där smetningen börjar, det är det tjockaste området och det är inte bra att observera.

Kroppen är den centrala eller mellanliggande delen av utsmetningen, det är det bästa området att observera under mikroskopet, för där är cellerna jämnt fördelade och deras morfologi bevaras.

Svansen motsvarar den sista delen av smetet; här är distributionen inte längre enhetlig och erytrocytmorfologin tenderar att gå förlorad.

Kvalitetskontroll i slidtekniken

I denna teknik spelar det en grundläggande roll:

-Rengöring och avfettning av objektglaset: det garanterar bra glidning av provet.

-Droppens storlek: med mycket stora droppar kommer en tjockare och längre smet att erhållas, med en mycket liten droppe blir spridningen kortare och extremt fin.

-Hastigheten som används i förlängningen: ju lägre hastigheten smetet blir tunnare, desto högre hastighet blir det tjockare.

-Utföringsvinkeln: ju mindre vinkeln desto finare smet, desto större vinkel desto tjockare.

-Steg på täckglas

Det används inte i stor utsträckning eftersom hanteringen av ömtåliga täckglas är besvärliga, men det ger stora fördelar, eftersom en bättre fördelning av celler erhålls genom hela utsmetningen.

En inte så tjock, inte särskilt fin droppe placeras i mitten av täckglaset. Omedelbart placeras ytterligare ett täckglas ovanpå detta på ett sådant sätt att spetsarna på båda täckglasen sticker ut och bildar en stjärna.

Droppen sprids spontant över båda täckglasens yta. I slutet av förlängningen skjuts varje bild snabbt till motsatt sida av varandra (en till höger och den andra till vänster) snabbt.

Tekniken ger två utstryk istället för en.

De placeras för att torka med spridningssidan uppåt. När den är torr är den fixerad och färgad med den valda tekniken. Låt det torka. En droppe fördjupningsolja placeras på en glidbana, utstrykningen placeras med utstrykningssidan nedåt och ses under ett mikroskop.

Kvalitetskontroll i täckglasstekniken

För att få en bra smet för denna teknik är det viktigt att:

-Rengöring av täckglas (hjälper provet att glida smidigt).

-Droppens storlek (påverkar smetens tjocklek).

-Hastigheten med vilken täckglaset separeras (påverkar spridningens homogenitet).

-Med automatisk utrustning

De kan göras genom något av dessa team: Spinner och Autoslide.

Spinnaren består av att placera en bild med en droppe blod på en speciell centrifugplatta. Provet centrifugeras vid höga hastigheter; på detta sätt bildas en homogen och fin smuts av provet. Det har nackdelen med möjligheten till hemolys av provet.

Autosliden är ett instrument som mekaniskt utför rörelserna för att utföra smet på objektglas. Du kan också fixa och fläcka utstrykningen. Det kan till och med anpassas till vissa automatiska hematologiräknare.

Tjock smetsteknik

För att söka efter hemoparasiter rekommenderas två utstryk: en med en fin droppe och en med en tjock droppe.

Utför en kapillär punktering, rengör den första droppen. Placera en fin droppe på ett objektglas och smet som tidigare förklarats. För den tjocka pärlan placerar du en stor pärla på en annan bild och sprids till en fyrkant på 1,55 mm. Låt de två smetarna torka.

Smetfärgning

Giemsa eller Wright-fläckar, bland andra, kan användas för fina droppar. Giemsa eller May-Grunwald Giemsa-fläck rekommenderas för tjocka utstryk.

Giemsa-fläck

Smetningen fixeras i 3 minuter med metanol, tappas och får torka igen. Smetet täcks sedan med Giemsa-fläck i 10-15 minuter. Det tvättas med destillerat vatten och får torka. För att observera under mikroskopet placeras en droppe nedsänkningsolja.

Wrights fläck

Utstrykningen täcks med Wrights fläck i 5 minuter. Kassera och placera buffertlösningen vid pH 6,8 i 6 minuter. Blås beredningen för att homogenisera. Tvätta med destillerat vatten och låt torka. Observera under mikroskopet.

Typer av defekta utstryk

Det förekommer hos praktikanter i finfördelningstekniken med objektglas.

Utstryk med områden med olika tjocklekar (tunt och tjockt ispedd)

Det beror på att den utförda rörelsen inte var konstant under spridningen, vilket gjorde stopp och startade om.

Mycket kort utsmetning

De har två orsaker: den ena beror på att markskivan har lyfts innan den når den andra änden av sliden. I detta fall är den extremt tjock och kort.

Å andra sidan, om utstrykningen är kort men tunn, beror det på att droppens storlek var mycket liten.

Smet med ett rakat område mot slutet av smet

Det har flera orsaker: den ena är att jordkanten är defekt, att trycket som utövas på den mottagande sliden ökas vid spridningstillfället eller att slipkanten på sliden bärs.

Smuts med vakuolbildning eller tydliga rundade eller elliptiska områden

De beror på användning av feta utstryk (dåligt tvättade och avfettade).

Mycket tjock eller mycket tunn utstryk

Droppar som är för stora ger mycket tjocka utstryk från början till slut och mycket små droppar ger mycket fina utstryk.

Histologi

Blodceller kan ses i en blodsmetning. Bland dem är:

-Erytrocyter eller röda blodkroppar

Mänskligt blod, erytrocyter eller röda blodkroppar och två vita blodkroppar. Taget och redigerat från: Viascos. Din iakttagelse är av största vikt. På denna nivå kan anemier, talassemi, benmärgssjukdom etc. upptäckas.

Antalet erytrocyter eller röda blodkroppar är ungefär 5 x 10 ⁶ mm3 hos män och 4,5 x 10 ⁶ hos kvinnor. Röda blodkroppar är formade som biconcave skivor med en central fysiologisk blekhet. De kan ses separat (normalt) eller bilda rouleaux-staplar (onormala).

Utstryk visar också poikilocytos (röda blodkroppar i olika former), anisocytos (röda blodkroppar i olika storlekar), anisopoikilocytos (olika former och storlekar), anisokromi (olika färger), erytroblaster (omogna röda blodkroppar), mikrocytos (mindre röda blodkroppar) ) och makrocyter (större erytrocyter).

När de uppvisar brist i mängden hemoglobin och den centrala bleken ökar, sägs det att det finns hypokromi. När en normal röd serie observeras kommer den att rapporteras som normocytisk och normokrom.

-Vita blodceller eller leukocyter

vita blod celler

Den normala mängden sträcker sig från 5 000 till 10 000 mm ³ . De förändras i smittsamma processer, i allergier och i leukemi. Flera typer kan särskiljas i blodets smet, vilket förklaras nedan.

Segmenterade neutrofiler

De representerar 55-65% av de totala leukocyterna. De mäter mellan 10-15 μm. De har en segmenterad eller lobad kärna som antar olika morfologier, därför kallas den polymorfonukleär.

De har rikliga neutrofila granuler i sin cytoplasma och vissa azurofiler. De ökar i bakterieinfektioner (neutrofili), minskar virusinfektioner (neutropeni).

Morfologiska avvikelser såsom pleokaryocytos (hypersegmenterade kärnor), bågar (omogna celler) eller makropolicyer (ovala och stora) kan observeras.

Andra ändringar:

-Toxiska granuleringar

-Pseudo Pelgerneutrofiler (kärnan uppvisar inte lobuleringar eller de är biloberade).

-Döhle-kroppar: mörkblå cytoplasmiska inneslutningar.

-Ökad cytoplasmisk basofili.

-Intracytoplasmatiska vakuoler.

-Cellulär picnos (förlust av internukleära broar).

Segmenterade eosinofiler

De representerar 1-3% av de totala vita blodkropparna. De mäter 9-10 mikrometer. De kännetecknas av närvaron av rikliga syrofila cytoplasmiska granuler och få azurofiler. Dess kärna har två lobuleringar. Deras antal ökar i allergier och sjukdomar med parasitiskt ursprung.

Segmenterade basofiler

De är extremt sällsynta och representerar 0-1% leukocyter. De mäter 10-12μm. Kärnan är vanligtvis oregelbunden i marginaler och kan vara bilobbad, men den ses inte på grund av det stora antalet basofila grova granuler i dess cytoplasma. Mycket sällan kan basofili ses.

lymfocyter

Det är små celler med basofil cytoplasma, med en kärna, väl definierad, rund, med kondenserad kromatin. Kärnan omfattar nästan hela cellen. De representerar 26-40% av blod leukocyter. De ökar i virusinfektioner (lymfocytos). Reaktiva lymfocyter kan ses.

monocyter

Celler större än lymfocyter, med större cytoplasma och lösare, ovala kromatinkärnor. De mäter 9-12μm. Cytoplasma är rikligt och verkar vanligtvis blekgråblått med standardfärgningstekniker. Vacuolerade monocyter och monocytos kan observeras bland förändringarna.

-Platelets

De mäter mellan 1,5-3 μm. Formen är rund eller oval. Normalvärdet sträcker sig från 150 000 till 350 000 blodplättar / mm3. De kan minska i vissa virusinfektioner. De har inte en kärna och är färgade lila. Abnormaliteter kan ses i denna serie, såsom makro- eller mikroplättar, trombocytos eller trombocytopeni och trombocytfragment.

Patologiska element

Blodparasiter

Hemoparasiter, såsom det orsakande medlet för malaria eller malaria (parasiter av släktet Plasmodium), kan ses i blodutstryk. Av detta skäl är det viktigt att smetanalysen manuellt analyseras, eftersom automatiserad utrustning missar detta.

Bakterie

I patologier såsom återfallande feber eller Lyme-sjukdom kan dess orsakande medel observeras. I detta fall motsvarar det Borrelia recurrenti spirochetes och Borrelia burgdorferi i blodet.

Omogna celler

Allvarliga fall observeras bland annat i leukemier, leukemoidreaktioner och leukoerythroblastisk reaktion. Vid bakterieinfektioner kan det finnas små avvikelser till vänster (förekomst av skurkar). Erytroblaster kan också ses i vissa anemier.

referenser

1. Blod och hematopoietisk vävnad. Finns på: sld.cu
2. Gomez A, Casas M. 2014. Angel. Klinisk laboratorietolkning. 8: e upplagan. Redaktör Médica Panamericana.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos-konton A. Jämförelse av parasitiska tätheter i tjock venös bloddropp kontra akupressur vid diagnosen Malaria vivax. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Finns på: scielo.org.
4. Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. Betydelsen av studien av perifert blodsmetning hos äldre. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Finns på: scielo.sld
5. Grinspan S. Studien av perifert blodsmet. Fortsättning av medicinsk utbildning. Finns på: bvs.hn/RMH