BAKTERIEKULTUR: TYPER, EGENSKAPER, METODER, KRAV - BIOLOGI - 2025

En bakteriekultur är resultatet av sådd av dessa mikroorganismer på näringsmedier för att de ska reproducera, vilket resulterar i uppkomsten av bakteriekolonier i fasta medier och molnighet i flytande media.

Såningsmetoden är mycket viktigt för att kunna distribuera ympningen på ett sådant sätt att de närvarande bakterierna sprids och kan utveckla ordentligt isolerade kolonier.

Olika grödor planterade av författaren i Bakteriologilaboratoriet i Biomedical and Technological Sciences Building, University of Carabobo. Källa: sammansättning av foton tagna av författaren MSc. Marielsa Gil.

Kolonierna erhållna i det fasta odlingsmediet är en följd av spridningen av den mikroorganism som ympades. Varje koloni startar från en enda bakterie, som kan multiplicera exponentiellt för att bilda en makroskopiskt synlig population.

Detsamma inträffar i flytande odlingsmedier men i detta fall observeras bakterietillväxt genom turbiditet.

Bakterietillväxt är möjligt när det valda odlingsmediet uppfyller de närings- och pH-förhållanden som är nödvändiga för utvecklingen av en viss bakterie. Dessutom är det nödvändigt att kontrollera andra variabler, såsom temperatur, inkubationstid, syrekoncentration, CO ₂ , bland andra.

Inte alla bakteriepopulationer behöver samma krav, även om vissa kan vara vanliga för nästan alla, såsom att mediet innehåller peptoner, är det också sant att det finns mer krävande mikroorganismer som dessutom kräver andra specifika ämnen, kallade tillväxtfaktorer.

Till exempel kan det nämnas att en del Haemophilus behöver närvaron av faktor X (hemin) och faktor V (NAD) för att växa.

Typer av bakteriekulturer

Bakteriekulturer kan vara polymikrobiella, rena eller blandade.

Polymikrobiella bakteriekulturer

Polymikrobiella kulturer är de som kommer från sådd av ett prov erhållet från en plats som har en normal mikrobiota, där en viss patogen också kan hittas.

Exempel: när en halspinnkultur utvecklas kan en patogen såsom Streptococcus pyogenes hittas, men den kommer att åtföljas av en vanlig mikrobiota i området.

I detta fall är en bra striering väsentlig för att tillåta tillväxt av de olika typerna av bakterier som finns närvarande isolerat.

Kolonin som har egenskaper som är kompatibla med en Streptococcus pyogenes-stam kommer att försiktigt beröras med platinuslingan och planteras sedan i ett jungfruligt odlingsmedium och därmed erhålla en ren kultur av den mikroorganismen.

Från denna rena kultur kan alla tester som krävs för att identifiera bakterierna genomföras.

Ren bakteriekultur

För att effektivt kunna identifiera en mikroorganism måste man arbeta med en ren kultur.

Rena kulturer kan erhållas som i fallet med det föregående exemplet genom återinsättning av en isolerad koloni av en polymikrobiell kultur, eller när ett prov som kommer från en normalt steril plats planteras och endast en patogen existerar (tillväxt av en enda typ av bakterier). Exempel: när en CSF utsädes från en patient med bakteriell meningit.

Ett annat sätt är när man återgår från en gammal ren kultur för att få en förnyad ren kultur.

Blandade bakteriekulturer

Dessa kulturer består av en blandning av mikroorganismer, eftersom de förekommer i naturen. I vissa industriella processer är användningen av blandade kulturer bekväm.

Det kan erhållas genom sammanslagning av flera rena kulturer, eftersom dessa möjliggör studier av bakteriella förhållanden.

De är till exempel användbara vid nedbrytning av xenobiotika i industriellt avloppsvatten, eftersom de fungerar som biologiskt nedbrytbara medel.

Egenskaper hos bakteriekulturer

De morfologiska egenskaperna hos kolonierna erhållna i bakteriekulturer kan vara mycket varierande.

Kolonier kan vara mycket små, måttliga eller stora och kan verka torra eller mucoid, blanka eller tråkiga. Beroende på strukturen kan den variera mellan slät och grov och beroende på formen kan de vara cirkulära, plana, konvexa.

Beroende på färg kan de vara: färglösa, vita, gula, rosa, fuchsia, röda, orange, beige, gråaktiga, grönaktiga, bruna, svarta eller med en metallisk glans, beroende på vilka bakterier som är inblandade och odlingsmediet som används.

Koloniernas gränser kan vara regelbundna eller oregelbundna. Andra kan å andra sidan presentera en enhetlig film som distribueras i nästan hela mediet som kallas "svärmande". Detta är karakteristiskt för Proteus sp.

Vissa bakteriekulturer avger lukt som är ganska karakteristisk för den involverade arten. Till exempel har en kultur av Pseudomonas aeruginosa en karakteristisk fruktlukt, medan släktet Proteus har en karakteristiskt otrogen lukt.

Exempel på kolonier beroende på deras storlek

Extremt liten: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Liten: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

Moderat: Enterobacteriaceae i familjen

Stor: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Exempel på kolonier enligt deras utseende

Torra: Lactobacillus confusus.

Mucoids: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Strålande: Klebsiella pneumoniae.

Opaque: Enterococcus faecalis, några stammar av Neisseria gonorrhoeae.

Exempel på kolonier enligt deras struktur

Släta kolonier: Micrococcus luteus

Grova kolonier: Sarcina ventriculi på näringsagar.

Exempel på kolonier enligt deras form

Cirkulär: Listeria murrayi och Micrococcus luteus på näringsagar.

Flat: Staphylococcus equorum på näringsämnen.

Konvex: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Exempel på kolonier enligt deras gränser

Rund kant: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Oregelbunden gräns: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Lobade kanter: Bacillus sp.

Exempel på kolonier enligt deras färg

Transparent eller färglös: Shigella sp på XLD-agar.

Vit: Staphylococcus hominis på blodagar.

Beige: Bacillus sphaericus och Lactobacillus confusus på näringsagar.

Gul: Staphylococcus aureus och Elizabethkingia meningoseptica på blodagar, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus på näringsagar,

Rosa: Escherichia coli på XLD-agar, Micrococcus roseus på näringsagar.

Fuchsia: Escherichia coli på Mac Conkey agar.

Violett: Chromobacterium violaceum.

Rödaktig: Serratia marcescens vid rumstemperatur på näringsagar.

Orange: Kurthia zopfii på näringsagar.

Gråaktigt: Sporosarcina ureae i jord extrakt agar.

Grönaktig: Pseudomonas aeruginosa på BHI-agar.

Brun: Enterococcus sp på galla esculin agar.

Svart: Salmonella enteritidis på SS-agar.

Med metallisk lyster: Escherichia coli på Endo agar.

Metoder för bakteriekultur

Facultativ aerob eller anaerob bakteriekultur

Det är den mest använda odlingsmetoden. Detta beror på att de flesta av de bakterier som är patogena för människan i första hand är aeroba eller fakultativa anaeroba; och för det andra är det mycket billigare och enklare än anaeroba kulturer. Exempel: Mycoplasma pneumoniae respektive Escherichia coli.

Anaerob bakteriekultur

Denna typ av kultur kräver fullständigt syreundertryckning. Odlingsmedier för anaeroba bakterier bör i allmänhet innehålla reducerande ämnen såsom: askorbinsyra, tioglykolat, cystein eller svavel för att eliminera de toxiska effekterna av luftburet syre.

Vissa innehåller indikatorer som resazurin som är blått i närvaro av syre och färglöst vid anaerobios. Exempel: Clostridium tetani.

Bakteriekultur vid mikroaerofili

Odlingsplattorna placeras i en mikroaerofil huva med ett tänt ljus, täckt. Ljuset förbrukar syret och slocknar. I detta tillstånd växer vissa bakterier, till exempel Streptococcus sp.

Material och krav

material

Materialen som krävs för att utföra en bakteriekultur är: Petriskålar eller rör med odlingsmedia eller buljong, platinoslinga, prov, Bunsenbrännare eller ugn.

Krav för att utföra en bakteriekultur

Kulturen av bakterier kräver många element som måste beaktas, såsom näringsämnen i mediet, pH, temperatur, syrekoncentration, CO2, fuktighet, bland andra.

näringsämnen

Bakteriekulturer kräver kulturmedier som innehåller makroelement och mikroelement. Bland makroelementen kan organiska substanser såsom peptoner, aminosyror, kolhydrater som kol- och kvävekällor nämnas.

Bland mikroelementen är de oorganiska substanserna eller spårämnena mangan, zink, nickel, bor, klor, selen, kisel, kobolt, koppar, bland andra.

Vätejonkoncentration (pH)

Koncentrationen av vätejoner (H ⁺ ) och hydroxyljoner (OH ^- ) i mediet där kulturen kommer att utvecklas är av avgörande betydelse, eftersom dessa bestämmer pH.

Det mest använda pH är neutralt (pH = 7,0), men det kan finnas medel där ett surt eller alkaliskt pH är lämpligt, till exempel om du vill isolera en acidofil respektive alkalifofil bakterie.

Temperatur

Temperatur är en mycket viktig faktor som påverkar tillväxten av bakteriekulturer. Bakterier kan vara psykrofila (växa vid temperaturer <20 ° C, mesofil (mellan 20 ° C och 42 ° C), termofil (40 ° C till 70 ° C), hypertermofil (70 ° C - 105 ° C).

Syrebehov

Aerob: de växer i närvaro av syre.

Mikroaerofil: de växer i närvaro av 5-10% CO _2.

Strikta anaerober: växer i frånvaro av syre.

Facultativa anaerober: växer i närvaro av syre eller utan den.

Aerotoleranta: de växer bra utan syre och tolererar lite syre.

Kulturmedier

Kulturmedier är speciella näringspreparat som framställs i laboratoriet för att få mikrobiell tillväxt eller kultur. Dessa medier varierar i konsistens, sammansättning och funktion. Varje laboratorium kommer att förbereda den typ av kulturmedium som passar deras behov.

Bakteriell kultur samling

Det finns institutioner eller organisationer som ägnar sig åt insamling, karakterisering, underhåll och distribution av bakteriestammar av klinisk, miljömässig eller industriell betydelse.

Dessa stammar används för forskningsarbete och för att utföra kvalitetskontroller på kulturmediet.

Exempel: stammarna American Type Culture Collection, Venezuelas Center for Collection of Microorganisms (CVCM) och stammar från National Institute of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba (INHEM), bland andra.

referenser

1. Benavides G, Hermida A. Isolering och identifiering av infödd bakterieflora från jorden på Cruz Verde och Guasca páramos. (Cundinamarca). 2008. Bogotá. Finns på: javeriana.edu.co/biblos
2. Hans S. Allmän mikrobiologi. Omega-utgåvor. 1991. Barcelona, ​​Spanien. Finns i: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R. Samling av mikrobiella kulturer: Anteckningar om deras utveckling. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Finns på: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan Redaktör Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utg. Redaktör Panamericana SA Argentina.